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單次給藥毒性試驗即急性毒性試驗，是指對動物通過單次或短時間內多次（一天內分2-3次）給藥，在給藥后的14天內連續觀察動物的情況，了解動物所產生的毒性反應及其嚴重程度，對闡明藥物的毒性作用、了解毒性靶器官、長期毒性試驗劑量設計和某些藥物I期臨床試驗起始劑量設計具有重要意義。
1、嚙齒類動物單次給藥毒性試驗
2、非嚙齒類動物單次給藥毒性試驗
| 試驗類型 | 動物種屬 | 藥物類型 | 給藥途徑 | 研究內容 |
| 急性毒性 | 小鼠 大鼠 豚鼠 家兔 比格犬 | 小分子 生物 天然產品 疫苗 中藥 | 經口：灌胃、膠囊 非腸道：腹腔注射、靜脈注射、肌肉注射、皮內注射、皮下注射、連續輸液、玻璃體內注射 其他：鼻飼、鼻腔、眼睛、直腸、陰道、植入 | LD50 最大耐受劑量 最大無毒性反應劑量 最小致死劑量 最大給藥量 |
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