脂質(zhì)體，作為一種由磷脂雙分子層構(gòu)成的微型泡囊，自上世紀60年代被提出以來，便因其獨特的藥物遞送特性而備受關(guān)注。脂質(zhì)體藥物憑借其獨特的優(yōu)勢，如提高藥物溶解度、改善藥物穩(wěn)定性、增強藥物靶向性等，在醫(yī)藥領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大的發(fā)展?jié)摿Α?/div>

配備了先進的 Thermo U3000-CAD檢測系統(tǒng)，靈敏度高。

案例：脂質(zhì)體化合物（Lipids）的制備案例

脂質(zhì)體化合物，無紫外，疏水性比較強，采用Waters 2545-Qda//UV/ELSD制備液相系統(tǒng)進行制備，結(jié)合質(zhì)譜信息，使用DAD/ELSD引導收集, 分離后純度可達98%以上。

美迪西可根據(jù)以下制備方法，提供脂質(zhì)體納米微粒制備服務(wù)。

溶劑注入法是一種比較簡單制備脂質(zhì)體的方法，將脂質(zhì)成分溶解在有機溶劑中，然后將所需的藥物以一定速率注射到有機相中以誘導脂質(zhì)體的形成。

https://doi.org/10.1016/j.heliyon.2022.e09394

薄膜分散法簡單易操作，將藥物和脂質(zhì)溶于有機溶劑后，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓除去溶劑，使脂質(zhì)在容器壁上形成薄膜，再加入合適的水性介質(zhì)，使脂質(zhì)薄膜水化脫落即可制備載藥脂質(zhì)體。

https://doi.org/10.1016/j.heliyon.2022.e09394

一般是將膜材的有機溶液與藥物水溶液超聲形成W/O型乳液，再減壓蒸發(fā)，就可得到脂質(zhì)體。此法適用于水溶性藥物和大分子活性物質(zhì)。

擠出法即脂質(zhì)體通過外力的作用，擠壓通過孔徑小于自身粒徑的濾膜時，由于剪切力的作用導致其發(fā)生形變，從而產(chǎn)生破裂，隨后破裂的雙層立即重新結(jié)合，形成更小的脂質(zhì)體。

微流控制備脂質(zhì)體是一種高效快速的方法，該技術(shù)通過精確控制微流體在微通道中的流動和混合，實現(xiàn)了脂質(zhì)體的高精度、高均一性的制備。

美迪西擁有的設(shè)備體系能夠全面覆蓋脂質(zhì)體藥物的研發(fā)流程，從處方篩選到制備工藝優(yōu)化，再到詳盡的性能分析與質(zhì)量控制，盡可能滿足客戶需求。

美迪西可提供以下專業(yè)服務(wù)：

(1) 鑒別、含量測定和脂質(zhì)相關(guān)降解產(chǎn)物檢查
(2) 粒徑及其分布、包封率、表面電荷、體外藥物釋放和藥物泄漏；結(jié)構(gòu)和形態(tài)、脂膜的熱力學性質(zhì)、包封體積、包封藥物的狀態(tài)
(3) 其他：pH值、脂質(zhì)體藥物的藥脂比、粘度、無菌、熱原/細菌內(nèi)毒素

(1) 性狀
(2) 鑒別（API、結(jié)構(gòu)或功能性成分（包括脂質(zhì)和非脂質(zhì)））
(3) 檢查（pH、滲透壓摩爾濃度、表面電荷、粒徑及其分布、濁度、包封率、體外釋放率、有關(guān)物質(zhì)、脂質(zhì)相關(guān)降解產(chǎn)物、裝量、殘留溶劑、可見異物、不溶性微粒、無菌、細菌內(nèi)毒素）
(4) 含量（API、結(jié)構(gòu)或功能性成分（包括脂質(zhì)和非脂質(zhì)））

(1) 性狀
(2) 檢查（pH、滲透壓摩爾濃度、表面電荷、粒徑及其分布、濁度、包封率、體外釋放率、有關(guān)物質(zhì)、脂質(zhì)相關(guān)降解產(chǎn)物、可見異物、不溶性微粒、無菌、細菌內(nèi)毒素）
含量（API、結(jié)構(gòu)或功能性成分（包括脂質(zhì)和非脂質(zhì)））

案例：腦靶向脂質(zhì)體研發(fā)

美迪西與美國南加州大學（University of Southern California）攜手，開發(fā)一種腦靶向脂質(zhì)體藥物遞送系統(tǒng)。這一合作項目將美迪西在藥物制劑研發(fā)領(lǐng)域的深厚積累與南加州大學在神經(jīng)科學方面的卓越研究能力進行結(jié)合，共同致力于解決藥物遞送領(lǐng)域的一大難題——如何有效跨越血腦屏障（Blood-Brain Barrier, BBB），以實現(xiàn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病（如阿爾茨海默病、帕金森病、腦腫瘤等）的精準治療。

脂質(zhì)體包載藥物（左）及對照（右）

納米藥物在體內(nèi)可能通過被動靶向、主動靶向、物理靶向、化學靶向等方式高選擇性地分于特定的器官、組織、細胞、細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)，改變原形藥物的藥代動力學特征如體內(nèi)組織分布，并進而影響其安全性和有效性。

可先開展體外試驗進行早期篩選和安全性風險預評估如細胞攝取及相互作用、補體激活情況等研究。應(yīng)選擇對毒性敏感的種屬。

可先開展體外試驗進行早期篩選和安全性風險預評估如細胞攝取及相互作用、補體激活情況等研究。應(yīng)選擇對毒性敏感的種屬。應(yīng)提供生產(chǎn)過程、關(guān)鍵質(zhì)量特征、制劑等方面的信息，如穩(wěn)定性（藥物和載體的化學穩(wěn)定性、物理穩(wěn)定性）、分散劑 /分散方法、納米特性（粒徑、粒徑分布、比表面積、表面電荷、表面配體等）、表面性質(zhì)（包衣及厚度、配體及密度等）、載藥量、濃度、溶解性、藥物從載體的釋放、納米藥物的聚集狀態(tài)及變化過程、表征的方法和檢測標準等。若納米藥物需稀釋和/或配制后給藥，應(yīng)關(guān)注納米藥物配制后在不同濃度、溶媒、體外細胞培養(yǎng)液或者其它體外試驗體系下的穩(wěn)定性、均一性和藥物釋放率等特征是否發(fā)生改變。

給藥劑量：除采用傳統(tǒng)的質(zhì)量濃度外可考慮同時提供質(zhì)量濃度和納米顆粒數(shù)目/比表面積的劑量單位信息。
對照組：包含新藥物活性成分的，設(shè)單獨的藥物活性成分組;包含新納米載體的，設(shè)無藥納米載體組。
檢測時間和頻率：可能在組織中清除慢，根據(jù)蓄積情況設(shè)置檢測時間點和檢測頻率，必要時延長恢復期。

免疫原性和免疫毒性：納米藥物主要經(jīng)單核吞細胞系統(tǒng)的吞細胞潔除，聚集到肝臟、脾臟和淋巴組織等器官組織 。可能吸附不同生物分子(以蛋白質(zhì)分子為主)形成生物分子層(如蛋白冠)，進而被免疫細胞表面受體識別，產(chǎn)生免疫原性和免疫毒性，還可導致類過敏反應(yīng)。可能存在免疫增強、免疫抑制、補體活化、炎反應(yīng)、過敏反應(yīng)、細胞因子釋放等風險。參考ICH S8。
神經(jīng)系統(tǒng)毒性：納米藥物與普通藥物相比更容易透過血腦屏障，有神經(jīng)毒性風險的藥物應(yīng)進行安全藥理試驗評估對神經(jīng)系統(tǒng)的影響。
遺傳毒性：新藥物活性成分的納米藥物和新納米載體/輔料需要開展遺傳毒性評價。
生殖毒性：納米藥物可能容易通過胎盤屏障、血睪屏障、血乳屏障等生物屏障，因此應(yīng)關(guān)注生殖毒性風險，參考ICH S5。
致癌性：參考ICH S1(長期使用的需進行)。
制劑安全性：同注射劑要求，體外溶血試驗應(yīng)注意，若納米藥物在溶液中會發(fā)生團聚，建議進行體內(nèi)溶血試驗。
毒代動力學：部分納米藥物可能在組織中存留的時間較長，組織暴露量高于系統(tǒng)暴露量，在體內(nèi)某些組織器官發(fā)生蓄積，重復給藥后可能產(chǎn)生明顯的毒性反應(yīng)。

經(jīng)皮給藥：納米藥物可能具有較高的毛囊滲透性或分布至局部淋巴結(jié)。毒性試驗中應(yīng)注意考察不同皮膚狀態(tài)(完整、破損、患病)、不同影響因素下(如光照)納米藥物在給藥局部和全身的暴露量差異以及相應(yīng)的毒性風險。
皮下給藥：具有更高致敏潛力。需關(guān)注不溶性納米藥物在皮下的蓄積和轉(zhuǎn)移以及相應(yīng)的毒性風險。
鼻腔給藥：相比胃粘膜更有利于藥物吸收，可能通過嗅神經(jīng)通路透過血腦屏障。
吸入給藥：納米藥物可廣泛分布于肺泡表面，應(yīng)關(guān)注局部/呼吸毒性。應(yīng)關(guān)注不溶性載體類納米藥物在肺部的蓄積和轉(zhuǎn)移。
靜脈給藥：與普通藥物不同的組織分布與半衰期。
口服給藥：不溶性納米成分可能蓄積在某些組織。

通過藥代動力學研究，美迪西能夠準確評估脂質(zhì)體藥物在體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄過程，為藥物的優(yōu)化提供科學依據(jù)。

載體類納米藥物需要分別測定血液中游離藥物和負載型藥物(總藥物)的濃度。

某些載體類納米藥物(如PEG化的)靜脈注射后可誘導免疫反應(yīng)，重復給藥后會加速清除，并在肝脾等組織聚集量增加。即加速血液清除(Accelerated Blood Clearance,ABC)現(xiàn)象。此類載體類納米藥物在多次給藥試驗時，建議考察是否存在ABC現(xiàn)象(如抗PEG抗體)。

因此，應(yīng)進行不同組織中總藥物分布研究，如可行，建議對靶器官和潛在毒性器官中的游離型藥物和負載型藥物分別進行測定。對于緩慢生物降解或具有明顯穿透生理屏障性質(zhì)的高分子載體材料，建議進行不同組織中總載體材料的分布研究。同時，鼓勵在不同組織中進行總粒子分布動力學和釋藥動力學研究。

載體類納米藥物中的活性藥物及其解聚的載體材料在體內(nèi)主要經(jīng)肝臟和其它組織中的代謝酶代謝。此外載藥粒子易被MPS吞噬，進而被溶酶體降解或代謝，可能對藥物和載體材料代謝/降解產(chǎn)物的種類和數(shù)量產(chǎn)生影響。因此，應(yīng)確定活性藥物和載體材料的主要代謝/降解途徑，并對其代謝/降解產(chǎn)物進行分析。

載體類納米藥物中的活性藥物和載體材料可能通過腎小球濾過和腎小管分泌進入尿液而排泄，或通過肝臟以膽汁分泌形式隨糞便排泄。載藥粒子自身一般不易經(jīng)過上述途徑直接排泄，需解聚成載體材料或載體材料降解后主要經(jīng)腎臟排泄。因此，應(yīng)確定給藥后活性藥物的排泄途徑、排泄速率及物質(zhì)平衡。同時鑒于載體材料的特殊性，建議根據(jù)載體材料的具體情況對其開展排泄研究。

案例 脂質(zhì)體化合物（Lipids）的制備案例

大鼠TK：同劑量下，脂質(zhì)體組游離藥物與普通注射液血漿暴露量對比，Cmax降低，但AUC（0-144h）更高，脂質(zhì)體包裹的藥物具有一定緩釋作用。

荷瘤小鼠組織分布：同劑量下，脂質(zhì)體與普通注射液相比，藥物在腫瘤組織中的蓄積量更高，可以更好地發(fā)揮藥效。

平臺采用先進的生物分析技術(shù)，對脂質(zhì)體藥物進行精確的定量分析，為藥物研發(fā)提供有力支持。

服務(wù)內(nèi)容：開展藥代動力學（PK）和毒代動力學（TK）樣本生物分析工作；全方位支持從早期篩選到臨床前以及臨床各階段的生物分析。

(1) 脂質(zhì)體目標分析物
指導原則指出進行藥代動力學研究時需測定生物樣本中負載型（或總藥物）和游離型（完全游離+蛋白結(jié)合）藥物濃度

(2) 前處理技術(shù)
蛋白沉淀（PPT）：破壞蛋白質(zhì)分子的水化作用或者減弱分子間同性相斥作用的因子，使蛋白質(zhì)在水中的溶解度降低而沉降下來轉(zhuǎn)化為固體的分離方法。常用有機試劑沉淀、等電點沉淀、鹽析等。
液液萃取（LLE）：根據(jù)化合物極性不同，采用相似相容原理，將分析物或不需要的干擾成分從一個液相（如生物樣品）提取到另一個不混溶液相（如有機溶劑），從而進行樣品清理。常用溶劑有正己烷、甲基叔丁基醚、正丁醇和乙酸乙酯等。
固相萃取（SPE）：機理類似于液相色譜，通過溶解在液體中的溶質(zhì)（分析物）與吸附劑材料（固定相）之間的親和力或相互作用實現(xiàn)。常用有反向SPE、離子交換SPE。
超濾：超濾是一種加壓膜分離技術(shù)，即在一定的壓力下，使小分子溶質(zhì)和溶劑穿過一定孔徑的特制的薄膜，而使大分子溶質(zhì)不能透過，留在膜的一邊，從而使大分子物質(zhì)得到了部分的純化。常用為超濾管。
此外還有平衡透析、超速離心、排阻色譜、柱切換色譜等分離方法。

固相萃取（SPE）
SPE 的大致流程：樣品準備→活化→平衡→上樣→淋洗→洗脫

不同生物基質(zhì)測定
指導原則中建議對血漿和組織樣品中總藥物和游離藥物濃度進行測定。但是目前組織還是采用物理勻漿處理的方式對樣品進行處理，這勢必會造成脂質(zhì)體的破碎，所以，現(xiàn)階段技術(shù)手段還做不到組織中游離藥物濃度的檢測。

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