- 解決方案ADC藥物的研究沒有固定的研究方案，由于偶聯(lián)方式、藥物結構的差異化，每個ADC藥物的臨床前研究都存在著不同的挑戰(zhàn)和難題。美迪西在ADC的臨床前一體化研究方案制定中與客戶深入交流，科研骨干將每一個案例的特點與多年實戰(zhàn)經驗和技術積累相結合，謹慎地將優(yōu)質實驗方案與結果提交到客戶手上。
截至2022年底，美迪西承接的IND申報類生物藥大項目已經100多項，包括單抗、雙抗、多抗、ADC、病毒疫苗和融合蛋白等。 截至2024年6月底，美迪西已成功助力28個ADC藥物獲批臨床，并有20多個ADC項目在研。Payload (50+)：DX8951f, SN-38, DM1, DM4, Exatecan, Dxd, MMAE/MMAF, Tubulysin M, PBD dimer, Seco-Duocarmycin MA, PNU159682, Doxorubicin analog等；Linker (200+): 具有多種Cleavable和uncleavable、親水性和疏水性以及新型Linker，如：Gly-Gly-Phe-Gly,VC-PAB, SMCC, N-SMP等；Payload+Linker (30+): SN-38-PEG-PAB, DXD-GlyGlyPheGly, DXD-VCPABDM1-SMCC, DM1-SPP, DM4-SPDB, MC-VC-PAB-MMAE/MMAF, MC-Val-Ala-PBD, VC-PAB-Dolastatin 10等；美迪西已完成毒素小分子：DM1，MMAE、Exatecan、Dxd，SN38等；美迪西已完成靶點：Her2、Her3、Trop2、Claudin 18.2、CD33、Muc1、FR等；美迪西有著開發(fā)并驗證針對不同靶點分析方法的豐富經驗，能夠有效根據需求分析靶點的表達水平、以及靶點可及性，為靶點的選擇提供建設性意見。
- ADC Payloads 合成美迪西的化合物庫中有多種不同作用機制的化學ADC payload分子供客戶備選，同時可以定制合成客戶所特定需要的一種或幾種ADC抗腫瘤化學藥物。美迪西的ADC payloads分子庫可以有效解決細胞毒素的選擇難題，在ADC payloads分子庫中有美迪西藥物發(fā)現(xiàn)團隊積累了多種不同作用機制、不同種類的細胞毒素可供客戶選擇，同時可以定制合成客戶所需要的一種或幾種ADC細胞毒素，滿足數量上的需求。通過自研和對外合作，美迪西可以提供所有已經上市ADC藥物的6種毒素可以提供已經上市ADC中毒素的衍生物達20種以上可以合成自研類毒素。微管蛋白抑制劑/穩(wěn)定性破壞劑DNA合成抑制劑拓撲異構酶抑制劑和RNA聚合酶II抑制劑
- ADC偶聯(lián)策略ADC 的三個主要組成部分是抗體 (Antibody)、連接子 (Linker) 和有效載荷 （Payload）。抗體負責靶向結合，可以是單克隆抗體、Fab抗體、雙特異性抗體或納米抗體。連接子連接抗體和payload。分為可切割和不可切割兩種類型。連接子是ADC穩(wěn)定性的關鍵，負責何時釋放有效載荷。Payload通常是一種具有明確作用機制的高活性毒素分子。對腫瘤細胞具有一定的殺傷作用。
基于半胱氨酸的ADC偶聯(lián)提供5 mg、50 mg、500 mg等抗體量級的偶聯(lián)服務，實驗周期：2-4周。QC方法包括SEC、HIC、LC-MS/MS等。DAR值≈4。提供其它偶聯(lián)方法的開發(fā)服務。 - ADC藥物體外研究美迪西擁有300種以上的腫瘤細胞系，多種可供選擇的ADC靶蛋白表達陽性和陰性的腫瘤細胞。并且提供靶點過表達細胞系構建服務，可以為客戶提供多種已知靶點的旁觀者效應分析服務。此外，美迪西生物團隊擁有豐富的細胞標記經驗及基于FACS的細胞活力分析能力。
ADC結合能力測試
A: 將HER2 ADC (BB-1701和DS-8201) 與N87細胞共孵育，然后進行FACS分析。B：將HER2蛋白固定在M5芯片上，將DS-8201梯度稀釋后注入芯片，通過Biacore 8K分析HER2和DS-8201的結合親和力。流式細胞術分析ADC與抗原表達細胞的結合能力（圖A：HER-2 ADC DS-8201、BB-1701與BT-474細胞結合能力測試）。 SPR分析ADC與抗原蛋白的結合能力（圖B：DS-8201與HER2蛋白結合測試）。 提供ELISA, HTRF等其它方法的結合能力測試。
ADC內吞實驗OVCAR-3 細胞與 FITC 標記的 ADC 孵育 24 小時，再與 Lyso-Tracker 和 DAPI 一起孵育，然后通過共聚焦顯微鏡進行分析。美迪西可提供ADC熒光標記服務 (如ADC-FITC，ADC-Cy5等）。 利用共聚焦顯微鏡分析抗體內吞（與溶酶體標記lyso-tracker共染色分析內吞部位）。 利用熒光Western或流式分析內吞效率。
細胞毒性測試ADC, 裸抗及payload與靶細胞共孵育，通過CCK-8、CTG、MTT等方法測試各個待測物對腫瘤細胞的毒性。（圖：ADC,裸抗及payload對NCI-N87及HCT116細胞的生長抑制曲線）
細胞周期檢測MV-4-11細胞(人髓性單核細胞白血病細胞)和PC-3細胞(人前列腺癌細胞)用Compound A處理并用PI染色，進行基于FACS的細胞周期分析。數據顯示Compound A顯著阻斷MV-4-11細胞周期，對PC-3細胞沒有太大影響。說明Compound A具有適應癥特異性。
細胞凋亡實驗MV-4-11細胞用Compound A處理并使用 PI/Annexin V染色，然后進行 FACS 分析。數據顯示Compound A促進MV-4-11細胞凋亡。 - ADC藥理學研究靶抗原結合活性 靶抗原相關藥理作用 (如:ADCC，CDC) 小分子化合物及活性代謝產物的作用機制(關注ADC與裸抗、游離小分子化合物或藥理活性代謝物之間的藥理作用差異，以及抗原表達水平對藥理作用的影響) 內化、裝解以及裂解后主要的游離小分子化合物的效應
- ADC 藥效學評價ADC的動物體內藥效試驗是ADC研究中一項重要的藥理參數，它直接反映了ADC的功效并影響臨床試驗設計。美迪西致力于為客戶提供成熟的評估ADC體內藥效的腫瘤模型，在AAALAC認證的環(huán)境下完成模型動物的建模和飼養(yǎng)，并以GLP-like的高標準完成相關藥效學評價試驗。目前美迪西已建立六大類近300種的腫瘤評價模型，能覆蓋大部分常規(guī)腫瘤疾病。 ADC藥物評價模型: 轉基因模型、異種腫瘤移植模型、同種腫瘤移植模型、PDX模型、人源化腫瘤移植模型、原位移植模型。 多種實驗動物：嚙齒類（小鼠/大鼠、兔子）；非嚙齒類（比格犬、小型豬、非人靈長類動物）。
通過MC-VC-PAB或PY-VC-PAB連接子使純化的人源化抗EGFR單克隆抗體(RC68）與MMAE偶聯(lián)生成RC68-MC-VC-PAB-MMAE和RC68-PY-VC-PAB-MMAE。RC68-MC-VC-PAB-MMAE和RC68-PY-VC-PAB-MMAE的體內抗腫瘤活性檢測通過美迪西進行。BALB/c裸鼠皮下移植H125細胞，當腫瘤長到 100-300 mm3 時，將小鼠隨機分組并每周用指定藥物進行靜脈給藥。通過測量腫瘤體積和小鼠體重從而衡量每種藥物對的影響。10 mg RC68-MC-VC-PAB-MMAE或RC68-PY-VC-PAB-MMAE 給藥處理后顯著抑制小鼠H125腫瘤的生長，且不影響小鼠體重。 - ADC 藥代動力學評價由于ADC藥物組成成分復雜，其PK特性必須借助多個分析物的評估，因此增加了分析的難度。美迪西在ADC藥物的體內分析中為各種ADC組分分析物提供了多種高質量的測試方法，通過分析動物體內采集的血漿/血清樣本，為客戶提供可靠優(yōu)質的PK數據。
待測物 描述 常用分析方法 Conjugated Antibody 至少偶聯(lián)一個藥物的抗體 LBA Total Antibody 全部偶聯(lián)、部分偶聯(lián)以及未偶聯(lián)的抗體 LBA Small Molecules 游離或被釋放的藥物小分子及其代謝物 LC-MS/MS ADA 可特異性結合ADC分子及其部分結構的抗體 LBA 
藥代及毒代測試
ADA免疫原性的測定
開發(fā)優(yōu)質穩(wěn)定的分析方法，最終能得到ADC和總抗體相關性很好的試驗結果。
對標國際實驗標準，與美國實驗室得出結論高度一致。
得益于先進的實驗設備和優(yōu)質穩(wěn)定的分析方法，不僅能夠對標國際實驗標準，得到與美國實驗室結論高度一致的結果，而且最終能得到ADC和總抗體相關性很好的試驗結果。免疫原性測試是生物藥的重要測定指標，需在研究的各個階段全程把控。生物藥的免疫原性可能會導致ADC在體內的快速清除，影響其PK特征和相關的分析。不僅如此，免疫原性可能還影響到ADC藥物的有效性和安全性。
為確保ADC藥物抗體篩選結果的精準性和有效性，美迪西免疫原性研究四大平臺為抗體免疫原性的檢驗提供了多種技術方案，最大程度滿足客戶的不同需求。美迪西免疫原性研究四大平臺：
ADC安全性評價
美迪西毒理研究部遵循ICH指導原則 S6和S9，結合每一個項目的具體情況定制個性化的安全性評價方案，提供符合NMPA、FDA、OECD、TGA等國際GLP標準的安全性評價服務，包括：
單次和重復給藥毒性試驗（伴隨毒代動力學研究）；
安全藥理（包括組織交叉反應）；
免疫原性檢測。
服務特點- 一站式整包服務所有研究均在同一園區(qū)內實驗室有序完成，切實保證實驗進度和項目溝通的高效性，占據數據獲取和評估的行業(yè)優(yōu)越性。
- 數次成功的研究經驗ADC藥物組成相對復雜且目前尚無針對ADC 藥物的指導原則，所以從降低研發(fā)風險角度考慮，選擇有臨床前研究經驗的研發(fā)合作伙伴，就顯得尤為重要。
- 美迪西特色研究平臺蛋白質/抗體藥代動力學研究平臺生物技術藥物非人靈長類安全評價專業(yè)技術服務平臺同位素藥物代學研究專業(yè)技術平臺
服務案例
