酶制劑檢測原理

酶制劑檢測應(yīng)用酶對底物專一性的特點，采用高純度底物，專一檢測某種酶制劑對底物的降解，然后測定產(chǎn)物含量（分光光度計）。 
標(biāo)準(zhǔn)曲線：通過用其高純度的產(chǎn)物制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過分光光度計的讀數(shù)查出對應(yīng)的產(chǎn)物含量，然后計算酶活。

酶制劑是指從生物中提取的具有酶特性的一類物質(zhì)，主要作用是催化食品加工過程中各種化學(xué)反應(yīng)，改進食品加工方法。中國已批準(zhǔn)的有木瓜蛋白酶、α—淀粉酶制劑、精制果膠酶、β—葡萄糖酶等6種。酶制劑來源于生物，一般地說較為安全，可按生產(chǎn)需要適量使用。檢測酶制劑產(chǎn)品質(zhì)量常用的指標(biāo)一般是酶活性，但也不是唯一的指標(biāo)。
我們提供酶制劑方面的檢測：包括酶活、常規(guī)指標(biāo)（水分、粒度等）、衛(wèi)生指標(biāo)（菌落總數(shù)、大腸桿菌、沙門氏菌等）。

可檢測的酶制劑產(chǎn)品

美迪西專業(yè)提供各種酶制劑的檢測服務(wù)：脂肪酶、木聚糖酶、歧化酶、纖維素酶、半纖維素酶、蛋白酶、β-葡聚糖酶、尿素酶、糖化酶、植酸酶、淀粉酶、果膠酶、木瓜蛋白酶、α—淀粉酶制劑、精制果膠酶、糖化酶、脂肪酶、角蛋白酶等。

蛋白質(zhì)活性檢測

常規(guī)的蛋白質(zhì)質(zhì)量分析手段包括SDS-PAGE蛋白質(zhì)電泳分析、內(nèi)毒素檢測與控制、酶活性檢測（終點法及動力學(xué)曲線）、基于細胞的蛋白質(zhì)活性分析等。 

酶制劑檢測相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)

GB25594-2010  食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品工業(yè)用酶制劑
NY/T722-2003  中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)　飼料用酶制劑通則　
QB1805.2一93  中華人民共和國輕工行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)　工業(yè)用糖化酶制劑
GBT20370-2006  生物催化劑酶制劑分類導(dǎo)則
GB8275-2009  食品添加劑　α-淀粉酶制劑
GB274-87  食品添加劑固定化葡萄糖異構(gòu)酶制劑
GB8276-2006  食品添加劑糖化酶制劑
QB1502-92  食品添加劑果膠酶制劑
GB20713-2006  食品添加劑a-乙酰乳酸脫羧酶制劑
QB1806一1993  洗滌劑用堿性蛋白酶制劑
NY/T722-2003  飼料用酶制劑通則
QB1805.2一93  工業(yè)用糖化酶制劑
QB1805.3-93  工業(yè)用蛋白酶制劑　
QB2525一2001  食品添加劑　α-葡萄糖轉(zhuǎn)苷酶　
QB/T1804一1993  工業(yè)酶制劑通用檢驗規(guī)則　和標(biāo)志、包裝、運輸、貯存
QB2526一2001  食品添加劑　真菌α-淀粉酶　
QB2583-2003  纖維素酶制劑　
QB/T2306一1997  耐高溫α一淀粉酶制劑　
DB33/T459—2003  飼料添加劑飼料用復(fù)合酶制劑　
QB/T1803一1993  工業(yè)酶制劑通用試驗方法　
GB/T18634一2002  飼用植酸酶活性的測定分光光度法　
GBT5522-2008  糧油檢驗糧食、油料的過氧化氫酶活動度的測定
GBT5523-2008  糧食、油料的脂肪酶活動度的測定
GBT5521-2008  谷物及其制品中α-淀粉酶活性的測定比色法
GBT21498－2008  大豆制品中胰蛋白酶抑制劑活性的測定
GB-T8622-1988  大豆制品中尿素酶活性測定方法
GBT5009.186-2003  乳酸菌飲料中脲酶的定性測定
GBT5413.31-1997 嬰幼兒配方食品和乳粉脲酶的定性檢驗
GBT5009.183-2003 植物蛋白飲料中脲酶的定性測定
GBT17811-2008 動物性蛋白質(zhì)飼料胃蛋白酶消化率的測定過濾法
GB05009-171 保健食品中超氧化物歧化酶（SOD）活性測定
GB/T5521-89 谷物和谷物產(chǎn)品α-淀粉酶活性的測定比色法
GB/T9826-88 小麥粉破損淀粉測定法　α-淀粉酶法
GB/T18932.16-2003 蜂蜜中淀粉酶值的測定方法分光光度法
GB/T22252-2008 保健食品中輔酶Q10的測定
NY/T911-2004 飼料添加劑　beta-葡聚糖酶活力的測定　分光光度法　
NY/T912-2004 飼料添加劑　纖維素酶活力的測定　分光光度法　
SB/T10317-1999 蛋白酶活力測定法
SN/T0800.3-1999 進出口糧食、飼料粗蛋白質(zhì)檢驗方法　
SN/T0800.4-1999 進出口糧食、飼料尿素酶活性測定方法　
CNCA∕CTS0016-2008 調(diào)味品、發(fā)酵制品生產(chǎn)企業(yè)要求
WST66-1996 全血膽堿酯酶活性的分光光度測定方法羥胺三氯化鐵法
WST67-1996 全血膽堿酯酶活性的分光光度測定方法硫代乙酰膽堿-聯(lián)硫代雙硝基苯甲酸法

酶活性檢測服務(wù)特點

• 更短的檢測周期-幫助客戶快速獲取精準(zhǔn)檢測結(jié)果
• 更低的檢測費用-合理的收費體系降低客戶測試服務(wù)成本
• 更完善的檢測方案-為客戶提供檢測分析一站式服務(wù)
• 更優(yōu)質(zhì)的售后服務(wù)-幫助客戶解決服務(wù)后期技術(shù)疑問

常見的酶活性測定方法

通常酶制劑活性的檢測是采用實驗室分析手段來進行評價，它可以用來篩選優(yōu)質(zhì)酶制劑、確定復(fù)合酶制劑的最佳組方及確定產(chǎn)品的最佳添加量等，酶制劑實驗室評價技術(shù)是目前飼料廠家應(yīng)用最為廣泛的一種方法。其操作相對簡單，檢測所用時間短，便于生產(chǎn)實踐應(yīng)用。酶活測定結(jié)果雖不能完全反映酶的使用效果，但通過檢測至少可以避免使用劣質(zhì)的酶制劑。目前測定酶制劑活性的方法主要有：
1、比色法
比色法是以反應(yīng)生成有色化合物的顯色反應(yīng)為基礎(chǔ)，通過比較或測量有色物質(zhì)溶液顏色深度來確定待測組分含量的方法，根據(jù)原理不同可分為還原糖法和色原底物法。
2、黏度法
這種方法是根據(jù)酶能夠降低一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)底物（控制pH值、溫度等條件）的黏度的能力來確定酶的活性。利用的底物主要有化學(xué)合成的底物和自然提取的底物。測定的酶的活性值是通過與同時測定的標(biāo)準(zhǔn)酶活性的比較，來確定酶的活性。該法可用于木聚糖酶、β-甘露聚糖酶、β-葡聚糖酶等酶活測定。這種方法的特點是通過降低底物的粘度來反映酶的活性，這也正是酶在體內(nèi)起作用的重要特征。該法雖然靈敏度較高，但重現(xiàn)性差，操作復(fù)雜費時，應(yīng)用難于普及。
3、免疫學(xué)法
用于酶活性分析的免疫學(xué)法包括ELISA法和免疫凝膠擴散法。這兩種方法是根據(jù)酶與抗體之間發(fā)生反應(yīng)，然后ELISA法通過第二步反應(yīng)，凝膠擴散法則通過印染過程來確定酶的活性。
這些方法非常靈敏，能夠檢測到極低水平的酶蛋白。但它們的缺點是對于每個產(chǎn)品的酶需要特殊的抗體，另外抗體能夠與非酶蛋白質(zhì)發(fā)生反應(yīng)。由于抗體本身所用的蛋白質(zhì)是特定的，因此，由不同生產(chǎn)者生產(chǎn)的同種類型的酶之間是沒有交叉性的。另外，采用實驗動物的敏感性也值得探討。
4、凝膠擴散法
這種方法是將酶作用的底物與某種凝膠混合后倒入培養(yǎng)皿中，凝固之后，在凝膠上切開一條鑿，倒入標(biāo)準(zhǔn)酶液和測試酶液。培養(yǎng)一定時間后，在切開的凝膠周圍能夠看到水解區(qū)域，區(qū)域的大小與酶的含量成正比。在某些情況下，還可以再加入其他試劑來顯示水解的區(qū)域。如木聚糖酶活力的測定。
這種方法雖然簡單，但培養(yǎng)時間長。因為這種方法是根據(jù)區(qū)域的大小來確定酶的活性，所以其準(zhǔn)確性要低于其他非擴散的方法。
5、比濁法
以酵母或酵母細胞壁在緩沖溶液中的濁度或吸光度的降低來表示酶活力，如β-葡聚糖酶活力的測定。
6、體外模擬消化技術(shù)
酶活測定畢竟不能反映外源酶在機體內(nèi)真實的作用效果，因此，對于體外法評定飼料營養(yǎng)價值的研究不斷增加。體外法評定飼料營養(yǎng)價值是通過模擬消化道內(nèi)溫度、pH、消化酶分泌、胃腸運動和養(yǎng)分吸收等參數(shù)，在體外建立一套與畜禽消化道內(nèi)環(huán)境接近的操作程序，對飼料及酶制劑進行營養(yǎng)價值預(yù)測和評定。常用的體外模擬消化技術(shù)包括：①胃蛋白酶—胰酶法；②胃蛋白酶—小腸液法；③胃蛋白酶—胰酶—瘤胃液法；④胃蛋白酶—胰酶—碳水化合物酶法。