酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）技術(shù)服務(wù)：各類酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的檢測(cè)、酶聯(lián)斑點(diǎn)圖像的分析、克隆形成自動(dòng)分析、溶血斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)、病毒斑等。

免疫酶技術(shù)(immunoenzymatic technique)  最早應(yīng)用的免疫酶技術(shù)是免疫酶組織化學(xué)染色，即用標(biāo)記的抗體與標(biāo)本中的抗原發(fā)生特異性結(jié)合，當(dāng)加入酶的底物時(shí)，在酶的作用下經(jīng)一系列生化反應(yīng)產(chǎn)生有色物質(zhì)，借助光鏡作出定位判斷。目前，應(yīng)用最廣泛的是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)。該法特異性強(qiáng)，敏感性高，既可檢測(cè)抗體，又能測(cè)定可溶性抗原。ELISA常采用的酶為辣根過(guò)氧化物酶(hosradish peroxidase，HRP)，其底物是二氨基苯胺(DAB)，底物被分解則呈棕褐色，可目測(cè)或借助酶標(biāo)儀比色。

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定enzyme linked immunosorbent assay（簡(jiǎn)寫ELISA）指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體結(jié)合專一性進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測(cè)方法。

ELISA是將抗原與抗體免疫反應(yīng)的特異性，同酶的高效催化作用相結(jié)合，而建立的一種非放射性標(biāo)記免疫檢測(cè)技術(shù)?？梢远ㄐ曰蚨繖z測(cè)體液中的半抗原、抗原和抗體。該技術(shù)用化學(xué)方法使酶與抗原或抗體結(jié)合生成酶標(biāo)記物，或通過(guò)免疫方法將酶與抗酶抗體相結(jié)合生成酶抗體結(jié)合物。

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Elisa)的基本原理有三條：
（1）抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫學(xué)活性；
（2）抗原或抗體可通過(guò)共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物，而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性；
（3）酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，可根據(jù)加入第五的顏色反應(yīng)來(lái)判定是否有免疫反應(yīng)的存在，而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。
酶聯(lián)免疫分析用抗原與抗體的特異反應(yīng)將待測(cè)物與酶連接，然后通過(guò)酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng)，用于定量測(cè)定。測(cè)定的對(duì)象可以是抗體也可以是抗原。

酶聯(lián)免疫分析測(cè)定方法：主要研究方法有間接法（常用于檢測(cè)抗體）/雙抗體夾心法（常用于檢測(cè)抗原）/抗原競(jìng)爭(zhēng)法（既可檢測(cè)抗原，亦可檢測(cè)抗體）。
1、測(cè)定抗體的間接法
a．將抗原吸附于固相載體表面，洗滌除去未吸附的抗原。
b．加抗體，保溫，形成抗原—抗體復(fù)合物洗滌除去其余的雜蛋白。
c．加酵標(biāo)抗抗體，保溫，洗滌。
d．加入底物，測(cè)定底物的降解量二抗體量。
2、測(cè)定抗原的雙抗體夾心法
首先將特異抗體的免疫球蛋白吸附在反應(yīng)板凹孔內(nèi)，洗滌除去未吸附的抗體，加入含有抗原的待測(cè)溶液，保溫形成抗原—抗體復(fù)合物，洗滌除去雜蛋白后再加上述特異抗體，由于抗原是多價(jià)的并未被抗體飽和，經(jīng)保溫則可形成抗體—抗原—抗體復(fù)合物，洗滌后加酶標(biāo)抗抗體，保溫洗滌后加底物呈色，中止酶活性，比色測(cè)定抗原量。
3、測(cè)定抗原的競(jìng)爭(zhēng)法

將含有特異抗體的免疫球蛋白吸附在兩份相同的載體（甲）和（乙）中，然后在（甲）中加入酶標(biāo)抗原和待測(cè)抗原，（乙）中只加酶標(biāo)抗原，其濃度相同于（甲）中加入的酶標(biāo)抗原的濃度，保溫洗滌后加底物呈色。待測(cè)液中未知抗原量愈多，則酶標(biāo)抗原被結(jié)合的量就愈少，有色產(chǎn)物就愈少，以此便可測(cè)出未知抗原的量，即等于（甲）與（乙）底物降解量的差值。

聯(lián)系我們

郵箱：marketing@medicilon.com.cn

電話：021 58591500

以上內(nèi)容是關(guān)于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定的介紹，來(lái)源于美迪西官網(wǎng)。