ALK激活多種途徑，包括磷脂酶 C γ (PLCγ), JAK-STAT, PI3K-AKT, mTOR, sonic hedgehog, JUNB, CRKL-C3G (也稱為 RAPGEF1)-RAP1 GTPase 和MAPK 信號級聯，影響細胞生長、轉化和抗凋亡信號傳導。受體蛋白酪氨酸磷酸酶β 和zeta 復合物(PTPRB/PTPRZ1) 通過去磷酸化使ALK失活。
ALK信號通路[1]
ALK抑制劑發展迭代歷程
2011年，在Soda等人發現ALK重排作為NSCLC中潛在的致癌驅動因素僅4年后，Crizotinib (克唑替尼)被FDA批準用于治療晚期ALK陽性NSCLC。Crizotinib是一種口服的小分子ATP競爭性ALK抑制劑，最初用作MET TKI，然后在發現ALK重排在NSCLC中的作用后迅速轉為靶向ALK。由此開始了ALK抑制劑的不斷迭代發展。
NSCLC中ALK 抑制劑研發歷程[2]
一代ALK抑制劑
Crizotinib（克唑替尼）
首款FDA批準上市的ALK-TKI藥物，2011年8月FDA批準上市，填補了當時靶向藥物在ALK陽性NSCLC領域的空白。Crizotinib是一種有效的口服酪氨酸激酶抑制劑，適用于ALK融合基因或局部晚期或轉移性ROS1融合陽性NSCLC。Crizotinib比化療療效更好，毒副反應更小。
二代ALK抑制劑
Alectinib（阿來替尼）
2015年12月FDA批準上市，用于治療經Crizotinib治療后疾病進展或無效的局部晚期或轉移性ALK陽性NSCLC。Alectinib是一款強效的選擇性ALK 抑制劑，針對Crizotinib難治性ALK陽性NSCLC且出現CNS 轉移患者具有良好療效。具有良好的入腦性。
Ceritinib（塞瑞替尼）
2017年5月FDA批準上市，用于治療ALK陽性的轉移性NSCLC。適用于ALK陽性、ROS1陽性的局部晚期或轉移性NSCLC。無進展生存期翻倍，腦轉移病灶療效顯著。
Ensartinib（恩沙替尼）
2020年11月NMPA批準上市。第一款用于治療ALK突變晚期NSCLC的國產1類新藥，為NSCLC患者提供了新的治療選擇。適用于ALK陽性的局部晚期或轉移性NSCLC，選擇性強。用于此前接受過Crizotinib治療后進展的或者對Crizotinib不耐受的ALK陽性的局部晚期或轉移性NSCLC。在療效上與同類進口藥相比更有優勢，尤其在腦轉移患者中具有更高的應答率，且具有良好可控的安全性。
Brigatinib（布加替尼）
2017年4月FDA批準上市，適用于治療經Crizotinib治療后不耐受的ALK陽性的NSCLC。同時靶向抑制ALK和EGFR。Brigatinib 是一款口服有效的選擇性ALK和ROS1 酪氨酸激酶抑制劑。與Crizotinib相比，Brigatinib在ALK抑制劑初治ALK陽性NSCLC患者中具有更好的總療效和顱內療效。Brigatinib長期使用耐受性良好。
三代ALK抑制劑
Lorlatinib（勞拉替尼)
2018年11月FDA批準上市，用于治療疾病持續進展的ALK陽性NSCLC，接受過Crizotinib和至少一種其它ALK抑制劑治療的轉移性疾病患者，或在接受Alectinib或Ceritinib治療后疾病發展為轉移性疾病的患者。比Alectinib的入腦性更強。Lorlatinib具有出色的血腦屏障穿透能力，無腦轉移的患者接受其治療能有效阻止腦轉移發生。Lorlatinib在化學結構上有比較獨特的大環酰胺結構，對ALK的穿透力與結合力都較強，因此在臨床上顯示較好的效果。
四代ALK抑制劑
雙突變活性 ALK TKI
開發四代ALK TKI主要是為了克服ALK突變，這些突變主要是由于連續使用“單突變活性” ALK TKI，特別是包括基于ALK G1202R 的雙突變。目前正在開發的四代 ALK TKI有TPX-0131和NVL-655等。除了廣譜的單一ALK突變外，TPX-0131 和 NVL-655 還可以抑制獲得性雙“復合”ALK突變。TPX-0131 和 NVL-655 在體外可以克服多重雙突變。
TPX-0131和NVL-655的抑制活性[3]
TPX-0131 是一種有效的 CNS 滲透性的大環分子，可抑制ALK融合蛋白。在細胞試驗中，TPX-0131 比目前已獲批的五種ALK抑制劑對WT ALK和許多類型的ALK抗性突變（例如 G1202R、L1196M 和復合突變）更有效。在生化分析中，TPX-0131有效抑制WT ALK和26個 ALK突變體 (單突變和復合突變)，IC50 < 10 nM。TPX-0131作用于ALK (G1202R) 和 ALK復合突變依賴性異種移植瘤模型，可導致腫瘤完全消退。大鼠口服給藥TPX-0131后，觀察到TPX-0131 在腦中的水平約為血漿中的 66%。
TPX-0131的結構設計[4]
美迪西助力ALK抑制劑研發
項目案例：ALK降解劑SIAIS164018
SIAIS164018是一款口服有效的降解劑，不僅可以降解ALK或突變型 EGFR，還可以降解其他參與轉移的腫瘤蛋白。尤其強效靶向L858R+T790M突變EGFR，這是非小細胞肺癌中最重要的兩個靶點。SIAIS164018抑制Calu-1和MDA-MB-231的細胞遷移和侵襲。SIAIS164018 還降解幾種與轉移有關的重要腫瘤蛋白，如FAK、PYK2 和 PTK6等。
多靶點降解劑SIAIS164018[5]
在此項研究中，科研人員通過美迪西評估了SIAIS164018在大鼠中靜脈和口服給藥的藥代動力學 (PK) 數據。數據顯示，SIAIS164018在體內具有良好的生物利用性和耐受性。
SIAIS164018的藥代動力學研究[5]
項目案例：ALK抑制劑CGT-9475
2022年7月22日，盛世泰科自主研發的新一代ALK抑制劑CGT-9475，獲得FDA批準進入臨床試驗。ALK抑制劑在臨床應用上具有顯著的優勢，但ALK抑制劑的使用會不可避免的產生繼發性耐藥以及腦轉移問題，CGT-9475旨在克服耐藥性和解決中樞神經系統轉移的難題，進行優質化和差異化的開發。CGT-9475在臨床前研究中，針對NSCLC細胞系中L1196M、RET等耐藥突變具有顯著抑制作用。同時，CGT-9475在臨床前研究展示出良好的血腦屏障穿透效果，將為NSCLC腦轉移患者帶來新希望。美迪西為CGT-9475的研發提供了一站式全套臨床前綜合性研發服務 (歷時兩年, 篩選出臨床前候選化合物, 再進行系統的藥學研究，藥效研究，藥代動力學研究，安全評價研究，IND申報)。CGT-9475有望用于已有ALK抑制劑耐藥后的后續治療。
項目案例：第四代ALK抑制劑創新藥研發
Lorlatinib作為第3代ALK抑制劑雖表現出優異的臨床療效但也面臨治療抵抗的問題，其中復合突變是導致抵抗的重要原因。以TPX-0131和NVL-655為代表的第4代能夠有效抑制復合突變，特別是NVL-655顯著改善了對TRKB的脫靶效應預期能夠解決現有藥物的神經毒性問題。美迪西使用TPX-0131和NVL-655等代表性的3代ALK抑制劑作為陽參，設計、合成具有一定新穎性的、較高活性的第四代ALK靶點小分子，并對其進行深入的探討和研究。
總結與展望
近年來，隨著中國“重大新藥創制”科技重大專項實施與拓展，中國本土醫藥研發創新能力極大提高，為全球醫藥研發領域注入了強大動力，意味著更多的創新藥有望加速上市。在藥物研發方向上，為滿足更多患者需求，越來越多的醫藥研發工作者們投入到靶向藥物研發中來，不斷聚力實現新突破！
參考文獻
[1] Carminia Maria Della Corte, et al. Role and targeting of anaplastic lymphoma kinase in cancer. Mol Cancer. 2018 Feb 19;17(1):30.
[2]Brandon Golding, et al. The function and therapeutic targeting of anaplastic lymphoma kinase (ALK) in non-small cell lung cancer (NSCLC). Mol Cancer. 2018 Feb 19;17(1):52.
[3] Sai-Hong Ignatius Ou, et al. Will the clinical development of 4th-generation "double mutant active" ALK TKIs (TPX-0131 and NVL-655) change the future treatment paradigm of ALK+ NSCLC? Transl Oncol. 2021 Nov;14(11):101191. doi: 10.1016/j.tranon.2021.101191.
[4] Brion W Murray, et al. TPX-0131, a Potent CNS-penetrant, Next-generation Inhibitor of Wild-type ALK and ALK-resistant Mutations. Mol Cancer Ther. 2021 Sep;20(9):1499-1507. doi:
