環(huán)肽藥物作為醫(yī)藥領域的一顆冉冉升起的新星，其獨特的結構和卓越的功能引起了全球科研人員的廣泛關注。這些環(huán)狀分子以其高穩(wěn)定性和選擇性，為治療多種疾病提供了新的治療策略。在環(huán)肽藥物的研究中，基因編碼展示技術和mRNA display技術發(fā)揮了重要作用。

mRNA display技術的應用范圍廣泛，不僅包括多肽和蛋白質適體的發(fā)現(xiàn)，還涵蓋了蛋白質相互作用機制的深入闡明和分析，為環(huán)肽藥物的研究提供了強有力的技術支持。

美迪西云講堂邀請生物部高級研究員/項目經(jīng)理劉超博士為您解答環(huán)肽藥物研發(fā)中常見的問題，一起看看吧！

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1 篩選獲得的大環(huán)肽有重復的序列嗎？

劉超博士：確實存在這樣的情況。在我們的測序分析中，我們發(fā)現(xiàn)了一些重復的序列。有時，這些重復可能意味著某個序列被多次篩選出來，導致拷貝數(shù)增加。可能有三個或四個序列指向同一個大環(huán)肽。對于這些具有相同序列的情況，我們將在后續(xù)的SPR驗證或合成過程中給予重點關注。

2 如果可以提供靶點蛋白，我必須攜帶列出來的GST或者Fc標簽嗎？是否能換成其他的純化標簽嗎？

劉超博士：可以通過下圖看到文庫的基本信息，環(huán)肽本身帶有His標簽的，標簽是為了輔助環(huán)肽的提純過程，除了His標簽之外，其他各種標簽也可用于靶點蛋白的純化。這些靶點蛋白上的標簽的關鍵作用是固定靶點蛋白，確保其在實驗過程中的穩(wěn)定地固定在beads上。

3 想問一下mRNA的環(huán)肽展示技術可以和生物合成相結合?利用植物中的環(huán)化酶去環(huán)化？

劉超博士：可以的，環(huán)化酶是通過兩個環(huán)肽，類似直播中提到的半胱氨酸成環(huán)的。在我們實驗室，環(huán)化是通過化學方法進行的，確保了環(huán)肽的完整性和功能性。環(huán)化完成后，我們會進行純化步驟，以確保獲得的環(huán)肽是完整且可以順利結合的。這一純化過程對于保證環(huán)肽的質量和活性至關重要，確保了我們能夠提供高質量的環(huán)肽產(chǎn)品。

4 你們?nèi)绾芜M行QC檢測的？

劉超博士：我們采用的是高通量測序技術，目前還在開發(fā)LC-MS的方法。在實驗的早期階段，我們通過銀染技術進行定性分析，以確保翻譯過程中多肽的生成和翻譯的順利進行。在mRNA/cDNA與大環(huán)肽共軛物階段，我們利用二代高通量測序技術，這有助于在篩選前確保文庫的質量，并提供更準確可靠的數(shù)據(jù)。

5 請問通常mRNA篩選一輪需要多久？

劉超博士：從DNA文庫到完成篩選和測序的整個流程，我們預計需要大約5至6周的時間。這個時間框架主要是由于文庫測序階段相對較長，大約需要兩周左右。實際上，如果只考慮操作過程，完整的操作可以在兩周內(nèi)完成。

如果您對于新藥研發(fā)臨床前研究過程中有一些困惑或者想要深入了解的專題內(nèi)容，可以留下您的問題和建議，美迪西希望和您一起，探索新藥研發(fā)的奇妙世界。

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