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首先是水相和乙醇相通過微流控混合,然后在線稀釋,用切向流透析進行緩沖液的置換、超濾濃縮,然后形成LNPs,再進行除菌過濾和無菌灌裝、凍存。
關鍵的處方工藝參數包括:
? 脂質濃度
? 各個脂質成分摩爾比
? 陽離子脂質和mRNA的摩爾比(N/P比)(因為一個含氮一個含磷,所以也稱作氮磷比)
? 水相與乙醇相的流速比
? 混合總流速
? 在線稀釋倍數
? 過濾關鍵參數
? 混合切相流透析步驟的保存時間
? 切相流透析參數
? 透析置換緩沖液的選擇
這些是關鍵的參數。
關鍵的質量屬性主要包括:
? LNPs的粒徑、粒徑分布和多分散系數
? 包封率
? 體內外效價
? 脂質納米粒的結構
? Zeta電位
? pH值
? 滲透壓
? 脂質含量
? LNP-mRNA 轉染